庞新安¹ , 白宝伟² , 姜喜³ , 陈加利³ , 焦培培¹

1新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地, 阿拉尔, 843300; 2塔里木大学生命科学学院, 阿拉尔, 843300; 3塔里木大学植物科学学院, 阿拉尔, 843300
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基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 282 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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本文以干旱荒漠盐生植物柽柳的幼嫩叶片为实验材料，探究摸索其总DNA的提取方法与RAPD-PCR的反应体系及扩增条件。结果表明，改良CTAB-高盐沉淀法较好地提取出了柽柳植物的总DNA，其产量、质量均有明显提高，比较适合于多数柽柳属植物的DNA提取；同时，通过单因素试验比较优化筛选出了适合于柽柳植物RAPD分析的最佳的PCR反应体系与扩增条件，其25 μL的反应体系中包含有Mg²⁺=3.3 mmol/L、dNTPs=0.15 mmol/L、引物=0.20 mmol/L、Taq DNA聚合酶=1.2 U、模板DNA=200 ng，其最适扩增条件为95 ℃预变性4 min，94 ℃变性30 s、36 ℃退火40 s、72 ℃延伸1 min、40个循环，72 ℃最终延伸10 min，4 ℃保存；另外，通过6条多态性引物的扩增效果证实该优化体系比较稳定，扩增条件比较合适，能够满足多数柽柳植物分子多态性的检测要求。

塔里木盆地；柽柳属；DNA提取；RAPD体系优化