王赟 , 夏雪 , 黄江涛 , 黄顺莉 , 吴仪 , 胡祖权

贵州医科大学生物与工程学院, 贵阳, 550004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 193 篇   
收稿日期: 2015年04月01日    接受日期: 2015年04月30日

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单链抗体可溶性大量表达是其生产应用的前提条件，本研究通过基因工程操作构建含有抗伏马菌素单链抗体基因H3的重组载体pHENHi-H3，转化大肠杆菌XL1-Blue，酶联免疫吸附实验检测不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时间对H3抗体的表达影响。优化后的单链抗体H3的原核表达条件为：菌液培养至OD₆₀₀达到0.5时加入终浓度为0.1 mmol/L IPTG，30℃诱导表达8 h。本研究通过对蛋白原核表达的主要影响因素进行优化，能够显著提高H3抗体的原核可溶性表达效率。

单链抗体；原核表达；酶联免疫吸附实验；条件优化