夏丹¹ , 许厚强¹ , 陈伟^1,2 , 陈祥¹ , 周迪¹ , 张雯¹ , 桓聪聪² , 赵焕平¹ , 张青青¹ , 孙成娟¹

1高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室, 贵州大学动物科学学院, 贵阳, 550025; 2贵州大学生命科学学院, 贵阳, 550025
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 219 篇   
收稿日期: 2015年06月01日    接受日期: 2015年06月30日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

实验采用RT-PCR方法克隆关岭牛MyoD基因的CDS区，利用EcoRⅠ、XhoⅠ酶对目的片段与PET32a(+)原核表达载体进行酶切，T4连接酶连接过夜，通过转化，测序，构建重组表达载体，并对该基因进行相关生物信息学分析。实验结果获得了关岭牛MyoD基因CDS区，成功构建了PET-32a(+)-MyoD重组表达载体。MyoD基因编码区为954bp，编码318个氨基酸，共有31个稀有密码子，表达蛋白大小为34.2kD。该蛋白为水溶性蛋白，等电点PI=5.8，在体内带负电，二级结构中α-螺旋、无规则卷曲较多。蛋白没有信号肽和明显的跨膜区，为胞内蛋白，主要存在于细胞核中。重组载体表达的MyoD蛋白带有His等标签，蛋白大小为53.6 kD，共497个氨基酸。实验对关岭牛MyoD蛋白的理化性质、结构特点进行了初步分析，以期为研究牛MyoD蛋白特性及其作用机制奠定理论基础。

关岭牛；MyoD基因；原核表达载体；生物信息学