白靖琨^1,2

1中国石油大学(华东)生物工程与技术中心, 青岛, 266580; 2淄博职业学院制药与生物工程系, 淄博, 255314
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基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 214 篇   
收稿日期: 2015年06月01日    接受日期: 2015年06月29日

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 趋化因子受体CCR1是G蛋白偶联受体家族的成员，在肿瘤细胞的生长和转移等方面有重要的调控作用。为了构建稳定表达人CCR1蛋白的TREX-HEK293细胞株，采用PCR技术扩增CCR1的基因编码序列，将序列连接到pcDNA4.0真核表达载体 ，经测序鉴定正确后用Lipofectamine^TM转染试剂把histag-CCR1基因导入TREX-HEK293细胞，经博莱霉素抗性筛选，四环素诱导，得到阳性克隆并扩大培养成系。采用Dot blot分析检测CCR1表达水平，筛选CCR1表达量最高的细胞株，用CCR1一抗对TREX-HEK293细胞进行免疫荧光染色。实验结果得到了抗博莱霉素阳性细胞克隆；免疫荧光染色结果显示，转染质粒的TREX-HEK293细胞膜呈现绿色荧光，表明成功建立稳定表达趋化因子受体CCR1的TREX-HEK293细胞株，并将CCR1蛋白成功表达在细胞膜上，为CCR1的研究工作提供依据及平台。

CCR1；TREX-HEK293；真核表达；稳转细胞