巴马小型猪转基因克隆胚胎融合/激活条件的优化  

胡林林1,2 , 许惠艳1,2 , 杨小淦1,2 , 陆阳清1,2 , 卢晟盛1,2 , 卢克焕1,2
1亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室/广西高校动物繁殖与生物技术重点实验室, 南宁, 530004; 2广西大学动物科学技术学院, 南宁, 530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 259 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日
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摘 要

本试验旨在建立一个适合于巴马小型猪转基因克隆胚胎生产的高效融合/激活体系,为生产足量的转基因克隆胚胎奠定基础。把hGFAP-DsRed基因转入巴马小型猪肾脏成纤维细胞并以转基因细胞为供体核,构建重构胚胎,比较各组胚胎的发育能力,筛选出适合转基因克隆胚胎生产的融合/激活参数。试验结果表明,脉冲时程30µs、1次脉冲、场强1.5kv/cm组,融合率、分裂率和囊胚率(87.32%、69.79%、21.74%)均显著(p<0.05)高于1.0kv/cm组(78.63%、45.07%、9.65%)和2.0kv/cm(63.87%、36.72%、5.49%);脉冲时程30µs时,融合率和囊胚率 (81.92%、19.56%)均显著(p<0.05)高于20µs (69.19%、7.51%)和40µs (69.28%、6.51%);3次脉冲组的融合率、分裂率和囊胚率(63.32%、38.09%、5.49%)均显著(p<0.05)低于1次脉冲(81.92%、63.40%、22.15%)和2次脉冲组(81.59%、67.46%、12.97%)。本实验室条件下,最适合于转基因克隆猪胚胎生产的融合/激活参数是 1.5 kv/cm、30µs 和1次脉冲。

关键词
广西巴马小型猪;融合/激活;胚胎发育;核移植;转基因
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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