段旭东^1,2 , 孙晓军^1,2 , 吴敬^1,2

1江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 无锡, 214122; 2江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室, 无锡, 214122
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 176 篇   
收稿日期: 2014年10月02日    接受日期: 2014年10月28日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23)，又名乳糖酶，是利用乳糖为底物制备低聚半乳糖的关键用酶。利用本研究室前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种，在摇瓶和3L发酵罐中对发酵条件进行了优化。优化后的的摇瓶发酵条件为：种龄为22 h，初始甲醇浓度为40 g/L，诱导温度26℃，每24 h添加10 g/L甲醇。该条件下诱导表达周期120 h，酶活可达到44.6 U/mL。在摇瓶发酵的基础上，在3 L罐优化了初始诱导菌体浓度。结果显示，当初始诱导菌体浓度(OD₆₀₀)为200时，发酵液的β-半乳糖苷酶的活力为204.9 U/mL，约为摇瓶酶活水平的4.6倍。

β-半乳糖苷酶；毕赤酵母；发酵条件优化；高密度发酵