马蔺(Iris lactea)液泡型H+-ATP 酶c亚基蛋白的原核表达与纯化  

周爱民1 , 马婧林2 , 关佳琦2 , 王金刚2 , 车代弟2 , 柳参奎1
1东北油田盐碱植被与恢复教育部重点实验室, 东北林业大学盐碱地生物环境研究中心, 哈尔滨, 150040; 2东北农业大学园艺学院, 哈尔滨, 150030
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 181 篇   
收稿日期: 2014年10月02日    接受日期: 2014年10月29日
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摘 要

液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)是植物生长、发育及应对逆境胁迫的关键酶,全酶由13种不同亚基组成,而V-ATPase c亚基(VHA-c)是分子量为16 kD的高度保守的脂质蛋白,对V-ATPase全酶的组装和活性具有重要作用。本研究中,利用RT-PCR方法从马蔺(Iris lactea)中克隆出IrlVHA-c基因全长读码框,将其构建到原核表达载体pGEX上并在大肠杆菌BL21中诱导表达。结果发现在0.1 mmol/L的IPTG终浓度下诱导8 h GST-IrlVHA-c融合蛋白高效表达,并利用层析方法纯化获得了GST-IrlVHA-c融合蛋白,进一步为研究IrlVHA-c蛋白的结构与功能提供帮助。

关键词
马蔺(Iris lactea);V-ATP酶;c亚基;原核表达;GST融合蛋白
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基因组学与应用生物学
• 第 33 卷
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