何芹¹ , 黄元姣^2,3 , 撖子建³ , 鄢雪敏² , 蔡琰²

1广西壮族自治区疾病预防控制中心, 南宁, 530021; 2广西医科大学生物化学与分子生物学教研室, 南宁, 530021; 3广西医科大学医学科学实验中心, 南宁, 530021
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基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 246 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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我们发现S100A8和S100A9蛋白质不仅在鼻咽癌患者血浆中水平高于健康人，而且在鼻咽癌组织及培养细胞中也存在高表达。本研究的目的是在鼻咽癌细胞中克隆S100A8和S100A9基因并构建表达质粒和在鼻咽癌细胞中表达，为内源性S100A8和S100A9蛋白质与鼻咽癌发生发展的关系研究奠定基础。PCR扩增目的基因S100A8和S100A9片段，将其插入载体pBudCE4.1构建S100A8-S100A9-pBudCE4.1表达质粒，经双酶切、PCR及测序鉴定后转染至人鼻咽癌细胞系(CNE1)进行表达并用real time-PCR及Western Blot进行检测。PCR、双酶切和测序结果显示，S100A8和S100A9氨基酸序列无变异(S100A8有1个碱基突变)，表达质粒S100A8-S100A9-pBudCE4.1构建正确。Real time-PCR和Western Blot结果显示，S100A8和S100A9基因在CNE1中正确转录与表达。成功克隆S100A8和S100A9基因并构建S100A8-S100A9-pBudCE4.1表达质粒且可在鼻咽癌细胞中稳定表达。

鼻咽癌；质粒pBudCE4.1；CNE1细胞系；S100A8；S100A9