窦勇¹ , 胡佩红² , 顾鹏程¹

1江苏财经职业技术学院, 淮安, 223003; 2淮安正昌饲料有限公司, 淮安, 223005
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 325 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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建立副溶血弧菌TDH毒素DAS-ELISA快速检测法，并运用于食品样品实际检测。以TDH+副溶血弧菌菌体及其TDH毒素制备免疫原，分别免疫新西兰大白兔和BALB/c小鼠，制备兔抗副溶血性弧菌多克隆抗体和鼠抗TDH毒素多克隆抗体，以鼠抗TDH毒素多克隆抗体为捕获抗体，兔抗副溶血弧菌多克隆抗体为检测抗体，建立DAS-ELISA检测法。采用间接ELISA法测定抗体效价，采用棋盘滴定法选择最佳的抗原抗体反应条件，并确定DAS-ELISA各反应条件。结果表明：鼠抗TDH多克隆抗体、兔抗副溶血弧菌多克隆抗体与TDH毒素抗原的最佳工作浓度依次为1:8000、1:4000和12µg/mL，酶标二抗最佳工作浓度为1:1000，检测总时间为5h，该法具有很强的特异性，对食品中TDH毒素的检测低限为60µg/g。与国标检测方法相比，具有检测时间短，准确度高的优点，将会得到广泛运用。

副溶血弧菌；TDH毒素；多克隆抗体；效价；DAS-ELISA