nptⅡ基因真菌表达载体的构建及在苹果炭疽叶枯病菌遗传转化中的应用  

吴建圆* , 冀志蕊* , 李壮 , 程存刚 , 周宗山 , 张俊祥
中国农业科学院果树研究所, 兴城, 125100
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 338 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日
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摘 要

本研究旨在构建1个适用于苹果炭疽叶枯病菌(Glomerella cingulata)的遗传转化载体,为系统研究该病原菌基因的功能提供便利。通过基因工程及分子生物学技术,将三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因启动子Pgap和新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)连结于质粒pCambia0380中。构建的载体pGapneoR1导入根癌农杆菌LBA4404后,通过农杆菌介导的转化技术(ATMT),成功将nptⅡ基因盒整合到苹果炭疽叶枯病菌基因组中。Southern blot分析结果表明,随机挑取的转化子T-DNA均以单拷贝插入到苹果炭疽叶枯病菌基因组中,表明该载体适合于苹果炭疽叶枯病菌的遗传转化。此外,该载体也可用于构建苹果炭疽叶枯病菌的目标基因的回补载体、超表达载体和荧光融合蛋白表达载体。

关键词
炭疽病;新霉素磷酸转移酶基因;农杆菌;启动子
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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