韩梁彦 , 王丽丽 , 张春晓

河北科技大学生物科学与工程学院, 石家庄, 050018
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 342 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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为实现高通量的产黄青霉(Penicillium. chrysogenum)突变株的分子鉴定，本实验探索建立一个适合PCR反应的简易产黄青霉基因组提取方法。该法对菌丝进行超声波处理10min、蜗牛酶(6mg/mL)纤维素酶(4000U/mL)双酶28℃酶解14h，等渗剂为0.7mol/L NaCl，后95℃加热处理10min，破坏其细胞壁结构以促使其释放DNA。结果表明，应用该法获得的裂解液上清稀释后可直接作为模板进行PCR反应，且扩增条带清晰。该方法操作简便，用样量小，可在96孔板一个孔中完成DNA模版的制备过程，可同时并行多个样品，适于大规模产黄青霉基因工程突变株的检测，并为其它真菌基因组的提取提供了参考。

产黄青霉；酶解法；基因组DNA提取；PCR