利用酵母双杂交系统研究桑脉带病毒核外壳蛋白自身相互作用  

张璐1 , 朱丽玲1 , 潘瑞兰2 , 陈保善2,3 , 蒙姣荣1,3
1广西大学农学院, 南宁, 530005; 2 广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530005; 3亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530005
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 371 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日
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摘 要

桑脉带病毒(mulberry vein banding virus, MuVBV)属布尼安病毒科番茄斑萎病毒属,是广西桑树病毒病的主要病原,为研究其核外壳蛋白(nucleocapsid protein, N)的自身相互作用,本文利用分离泛素酵母双杂交膜系统构建了N蛋白的诱饵表达质粒和猎物表达质粒并转化酵母菌株NMY51。诱饵表达质粒pBT3-SUC-MuVBV-N或pDHB1-MuVBV-N和阳性对照质粒pOst1-NubI共转化的酵母菌在筛选性营养缺陷型培养基上SD-trp-leu-his-ade (SD-AHLW)均能正常生长,而与阴性对照质粒pPR3-N共转化的酵母在营养缺陷型SD-AHLW平板上不能正常生长。结果表明,N蛋白诱饵质粒的表达产物没有自我激活活性,对酵母细胞也没有毒性。N蛋白诱饵表达质粒及其猎物表达质粒共转化的酵母也可以在SD-AHLW培养基上正常生长,说明N蛋白在酵母细胞中可发生自我相互作用。本研究结果为今后研究MuVBV N蛋白的功能以及通过筛选桑cDNA文库获得互作寄主因子奠定了良好的基础。

关键词
桑脉带病毒;核外壳蛋白;自身相互作用;分离泛素酵母双杂交膜系统
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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