胡锦涛 , 贺兵 , 赵玉濛 , 成博伦 , 张枫 , 张燕 , 殷红

西北大学生命科学学院, 西安, 710069
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 370 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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对分离自青海大骨节病区小麦籽粒中优势内生真菌6-5-1菌株进行菌种鉴定并探讨其发酵产物对兔膝软骨细胞的影响。方法：通过显微形态学观察及ITS 序列分析进行菌种鉴定；其发酵产物用75%乙醇提取，再将乙醇总提物采用不同极性有机溶剂（石油醚、乙酸乙酯和乙醚）进行萃取，乙醇总提物及不同萃取分部作用于培养兔软骨细胞；四甲基偶氮唑蓝（methylthiazolyldiphenyl-tetrazoliumbromide ,MTT）显色法检测提取物对细胞存活率的影响，甲苯胺蓝（toluidine blue, TB）染色法检测细胞蛋白聚糖表达，免疫组织化学法检测Ⅱ型胶原蛋白表达；RT-PCR检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白mRNA的表达。结果： 经鉴定6-5-1菌株为三线镰孢霉（Fusarium tricinctum）。其发酵产物乙醇总提物对兔软骨细胞存活率有较强的抑制作用，对蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的合成与mRNA的表达均有抑制作用；其不同极性分部提取物对软骨细胞也有损伤作用，且损伤程度各不相同，以石油醚分部作用最强，但各分部均弱于乙醇总提物。 结论：6-5-1菌株代谢产物中应该有多种对软骨细胞产生损伤的物质，且这些物质可能存在协同作用。石油醚分部中可能存在已知损伤软骨细胞毒素以外的其他物质。

内生真菌；发酵产物；软骨细胞；Ⅱ型胶原蛋白；蛋白聚糖；细胞存活率；细胞损伤