鲁曦 , 傅恩清 , 潘蕾 , 穆德广 , 李王平 , 金发光

第四军医大学唐都医院呼吸内科, 西安, 710032
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 403 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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本研究利用λRed重组系统构建了肠毒性大肠杆菌（ETEC）H10407菌的gspD基因敲除株，并利用PCR和测序技术进行了验证。随后对gspD基因敲除株和野生株生长曲线进行测定，并利用western-blot技术对培养上清液和细胞沉淀中的LT毒素分别进行检测。发现gspD基因敲除对ETEC H10407生长无显著影响，野生型大肠杆菌的LT毒素不仅存在于培养上清液中，还存在于细胞沉淀，而gspD基因敲除株的LT毒素仅在细胞沉淀中被检测到。本研究的结果表明gspD基因敲除的ETEC，其LT毒素在细菌细胞内积累并不释放至细胞外，说明II型分泌系统（T2SS）中的gspD基因对调控LT毒素分泌至细胞外起到了关键作用。

肠毒性大肠杆菌；基因敲除；LT毒素；Red重组