1贵州大学动物科学学院,贵阳, 550025; 2贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室, 贵阳, 550025
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 48 篇
收稿日期: 1970年01月01日 接受日期: 1970年01月01日
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 48 篇
收稿日期: 1970年01月01日 接受日期: 1970年01月01日
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摘 要
为了进一步研究鸭肠炎病毒核衣壳蛋白的致病机理,根据GenBank PKCI基因序列,设计并构建pSilencer-PKCI-l~4,比较后选取抑制效率最高的pSilencer转染DEF细胞,采用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析靶向 PKCI基因RNA干扰下PKCI基因转录变化,结果显示:pSilencer-PKCI-1~4分别转染DEF细胞,其沉默效率分别为70.01%、66.45%、74.6%和76.02%;取pSilencer-PKCI-4与DEV同时处理DEF细胞,发现处理后48h时pSilencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为64.97%;pSilencer-PKCI-4转染24h后再感染DEV,在处36h时pSilencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为54.25%;感染DEV 24h后再转染pSilencer-PKCI-4,在处理72h时pSilencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为47.83%。
关键词
鸭肠炎病毒;蛋白激酶C抑制蛋白;RNA干扰
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