2. 北京林业大学微生物研究所, 北京, 100083
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基因组学与应用生物学, 2011 年, 第 30卷, 第 26 篇 doi: 10.5376/gab.cn.2011.30.0026
收稿日期: 2011年04月28日 接受日期: 2011年05月20日 发表日期: 2011年06月20日
引用格式(中文):
杜萍等, 2011,野生毛木耳SRAP-PCR反应体系的建立与优化,基因组学与应用生物学(online), Vol.30 No.26 pp.1166-1173 (doi: 10.5376/gab.cn.2011.30.0026)
引用格式(英文):
Du et al., 2011, Establishment and optimization of SRAP-PCR reaction system for wild Auricularia polytricha, Jiyinzuxue Yu Yingyong Shengwuxue (Genomics and Applied Biology), Vol.30 No.26 pp.1166-1173 (doi: 10.5376/gab.cn.2011.30.0026)
为获得理想的野生毛木耳(Auricularia polytricha) SRAP扩增效果,本文采用单因子试验对影响SRAP-PCR反应的各个反应参数(模板DNA、dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+浓度和引物)进行了优化。建立了野生毛木耳SRAP-PCR最佳的反应体系:即25 μL体系中包含Taq DNA聚合酶1.5 U、Mg2+ 1.5 mmol/L、dNTPs 0.48 mmol/L、模板DNA 25 ng、正反向引物浓度均为0.4 µmol/L,10×PCR buffer 2.5 μL,ddH2O 14.7 μL。然后采用最适反应体系筛选出10对扩增稳定、多态性丰富的SRAP引物组合,为野生毛木耳的遗传多样性分析及育种工作提供了理论基础。