曾盼 , 张丽 , 邓立 , 李荣秀

上海交通大学生命科学技术学院, 微生物代谢国家重点实验室, 上海, 200240
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 121 篇   
收稿日期: 2016年01月01日    接受日期: 2016年02月03日

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肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor alpha, TNF-α)在人体内的毒副作用可以通过定点突变的方式得以改善。本研究结合公开文献及空间结构展示软件(Discovery studio 3.5)对人TNF-α进行了的点突变实验。运用重叠PCR方法成功引入S95F、Y115F、Y119W和S147Y四个单点突变。经原核表达及镍柱亲和层析纯化后得到人TNF-α及其点突变蛋白。通过测定人TNF-α及其点突变蛋白的生物活性发现三种点突变(S95F, Y115F, Y119W)都显著降低人TNF-α对L929细胞的杀伤率。小鼠免疫实验证明4个突变蛋白均可刺激机体产生针对人TNF-α的抗体效应。

TNF-α；点突变；L929细胞；免疫原性