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基因组学与应用生物学, 2011 年, 第 30卷, 第 24 篇 doi: 10.5376/gab.cn.2011.30.0024
收稿日期: 2011年03月17日 接受日期: 2011年05月05日 发表日期: 2011年05月13日
引用格式(中文):
姜宝杰等, 2011,利用SMART法构建花生果针全长cDNA文库,基因组学与应用生物学(online), Vol.30 No.24 pp.1155-1161 (doi: 10.5376/gab.cn.2011.30.0024)
引用格式(英文):
Jiang et al., 2011, Construction of peanut gynophore full-length cDNA library with SMART method, Jiyinzuxue Yu Yingyong Shengwuxue (Genomics and Applied Biology), Vol.30 No.24 pp.1155-1161 (doi: 10.5376/gab.cn.2011.30.0024)
果针是花生实现地上开花、地下结果的关键器官,果针的研究历来受到植物学家的重视。为进一步筛选、克隆和分析果针特异基因及研究花生果针发育的分子机理,我们以花生果针为材料,利用改良的CTAB法提取总RNA,根据SMARTTM cDNA文库构建试剂盒所示方法合成cDNA,限制性酶切消化后连接到质粒载体pDNR-LIB,构建花生果针全长cDNA文库。经鉴定,原始文库的滴度为1.3×106 cfu,重组率达100%,60%的插入片段在1.0~2.0 kb之间,插入片段平均大小在1.0 kb左右,扩增文库滴度达到了3.82×109 cfu。说明所构建的花生果针文库属高质量的全长cDNA,为筛选和克隆花生果皮特异表达基因和研究花生果针发育的分子机理提供了基础。