聂永伟 , 戴柏 , 张思源 , 诺明途 , 张静 , 梁浩 , 刘东军

内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室, 呼和浩特, 010070
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 130 篇   
收稿日期: 2015年12月28日    接受日期: 2016年02月02日

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为构建小鼠FNDC5基因的真核表达载体pEYFP-N1-FNDC5，预测FNDC5的N-连接糖基化修饰位点。在质粒pEYFP-N1的多克隆位点插入小鼠FNDC5基因构建真核表达载体pEYFP-N1-FNDC5，用脂质体转染HeLa细胞。转染48 h后，用免疫印迹法检测融合蛋白的表达，使用激光共聚焦显微镜观察FNDC5融合蛋白的亚细胞定位。利用NetNGlyc 1.0 Server程序，预测FNDC5蛋白N-连接糖基化修饰位点。结果显示：与对照组相比，真核表达载体pEYFP-N1-FNDC5能够表达FNDC5融合蛋白，且FNDC5融合蛋白定位于细胞膜。FNDC5蛋白的Ⅲ型纤连蛋白结构域区存在两个N-连接糖基化修饰位点。上述结果表明FNDC5真核表达载体构建及表达成功，FNDC5蛋白存在N-连接糖基化修饰位点。

FNDC5基因；真核表达载体；FNDC5亚细胞定位；N-连接糖基化位点