李果明 , 雷桅 , 税晓容

作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 382 篇   
收稿日期: 2016年05月09日    接受日期: 2016年05月10日

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黄芩是一种传统的中药，黄芩苷是其重要的药用成分之一，具有广泛的药理作用并被用于多种疾病的治疗，具有巨大的药用价值和经济价值。CHS是催化黄芩苷合成限速步骤的关键酶，其表达量对黄芩苷的积累起关键的作用。本研究利用基因工程的手段，构建黄芩的CHS过表达载体，并将其导入根癌农杆菌中，拟在黄芩中持续表达CHS，促进黄芩苷合成。基于NCBI上公布的黄芩基因信息，设计特异引物，通过RT-PCR技术扩增CHS的cDNA全长序列，并利用生物信息学软件对序列进行分析，在引物两端引入特异酶切位点，将目的序列CHS通过限制性内切酶酶切和连接的方式，构建载体pBI 121-35S-CHS。通过PCR和酶切的方法进行验证，获得黄芩CHS基因的高效表达载体，可直接用于黄芩的遗传转化，使CHS基因表达量增加，促进黄芩苷的合成。

黄芩；黄芩苷；CHS；RT-PCR；遗传转化