解帅帅 , 韩宏岩 , 许维岸

作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 387 篇   
收稿日期: 2016年05月10日    接受日期: 2016年06月10日

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摘  要  ：【目的】制备谷氨酰胺-tRNA合成酶（GlnRS）多克隆抗体，为下一步深入研究其结构与功能做准备。【方法】以GlnRS全长基因为模板，PCR获取编码N端236个氨基酸的基因片段，将PCR产物插入 pET28a以构建N（1-236）-GlnRS的重组表达载体(pET28a-N-GlnRS)，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达N-GlnR重组蛋白，用镍柱对表达的蛋白进行纯化，将纯化的蛋白对BALB/c小鼠采取皮下注射制备多克隆抗体，离心取血清，最后对制备的抗体进行检测。【结果】PCR获得了目的片段，成功构建表达载体，获得表达的N端GlnRS的236个氨基酸重组蛋白，血清抗体具有很好的特异性，可用于GlnRS检测。【结论】以N-GlnRS重组蛋白为抗原制备的抗体对GlnRS具有很好的免疫特异性，为下一步在蛋白水平深入研究GlnRS的结构与功能提供了抗体准备。

谷氨酰胺-tRNA合成酶；载体构建；原核表达；多克隆抗体制备