马氏珠母贝生长激素诱导跨膜蛋白基因GHITM克隆与表达分析  

罗少杰1 , 陈伟耀1 , 杨创业1 , 王庆恒1,2 , 焦钰1 , 邓岳文1,2
1广东海洋大学水产学院, 湛江, 524025; 2广东省珍珠养殖与加工工程技术研究中心, 湛江, 524025
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 304 篇   
收稿日期: 2016年03月23日    接受日期: 2016年04月20日
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摘 要

摘要:生长激素诱导跨膜蛋白(growth hormone-induced transmembrane protein,GHITM)是是一类在进化上高度保守的跨膜蛋白,参与机体生长发育、老化及先天免疫等过程。为探究GHITM在马氏珠母贝生长发育过程中的作用,本实验利用cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE),克隆得到马氏珠母贝GHITM(Pinctada martensii GHITM,Pm-GHITM)基因cDNA全长序列,并对其序列特征以及在组织中的表达进行分析。结果显示:Pm-GHITM基因cDNA全长为1468bp,其中,开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)为1017bp,编码338个氨基酸,5’ UTR长62 bp,3’ UTR长389bp,分子量约为35.48 ku,等电点(PI)为9.87;多序列及系统进化树分析表明Pm-GHITM与其他物种的GHITM有较高的同源性,与太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)的GHITM相似度最高,为67%;结构域分析结果表明Pm-GHITM序列中包含一个高度保守的BI-1(Bax inhibitor-1)结构域;荧光定量数据指出Pm-GHITM在马氏珠母贝的血淋巴、外套膜、足、鳃、性腺、闭壳肌以及肝胰腺中均有表达,在性腺的表达量最高,肝胰腺和闭壳肌次之,血淋巴中的表达量最低(P<0.05)。本研究为进一步阐述Pm-GHITM在马氏珠母贝生长、发育以及先天免疫中的作用提供理论基础。

关键词
马氏珠母贝; Pm-GHITM;基因克隆;荧光定量;表达分析
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基因组学与应用生物学
• 第 35 卷
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