魏洪美^1,2 , 任锡毅^2,3 , 杨兵² , 黄青青^1,2 , 刘永翔^2,3 , 乙引¹

1贵州师范大学, 贵阳, 550001; 2贵州省农业生物技术重点实验室, 贵阳, 550006; 3贵州省生物技术研究所, 贵阳, 550006
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 139 篇   
收稿日期: 2015年12月28日    接受日期: 2016年02月01日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

为了提高竹黄菌(Shiraia bambusicola P. Hennings)中原生质体用于遗传转化时的转化效率，研究竹黄菌原生质体制备及再生的最佳条件，建立竹黄菌原生质体的高效遗传转化体系。本研究以竹黄菌为材料，采用正交试验分析方法，对影响竹黄菌原生质体制备及再生的主要因素，不同酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂及菌龄、不同再生培养基等进行了系统的研究。结果表明，以0.6 mol/L NaCl为稳渗剂，用组合酶(质量分数1%裂解酶和质量分数1.5%崩溃酶按4:6体积比混合)在33℃条件下对菌龄为6 d的菌丝体酶解2 h，原生质体产量最高，达到10.57×106个/mL；以0.6 mol/L蔗糖为稳渗剂，用组合酶(质量分数1%裂解酶和质量分数1.5%崩溃酶按4:6体积比混合)在29℃条件下对菌龄为4 d的菌丝体酶解2 h，原生质体再生率最高，为0.293%；最适合竹黄菌原生质体再生的培养基是TB3再生培养基。

竹黄菌；原生质体制备；原生质体再生；正交试验