广东海洋大学水产学院, 湛江, 524025
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 138 篇
收稿日期: 2015年12月28日 接受日期: 2016年02月01日
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 138 篇
收稿日期: 2015年12月28日 接受日期: 2016年02月01日
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摘 要
collagen VI (COLVI)是胶原蛋白家族的重要成员,广泛分布于动物体细胞外基质,在脊椎动物骨骼形成过程发挥重要作用。为了探究COLVI在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究运用聚合酶链式反应(PCR)和cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得了马氏珠母贝PmCOLVIA6基因的全长序列,克隆获得其启动子区域,并对其蛋白结构进行了分析。荧光定量PCR技术检测了该基因在马氏珠母贝各个组织的表达量分布,并利用原位杂交技术检测PmCOLVIA6基因在外套膜的表达定位。结果表明:PmCOLVIA6序列全长为2 100 bp,开放阅读框(ORF)长为1 875 bp,编码624个氨基酸,5'非翻译区(5'UTR)长56 bp,3'非翻译区(3'UTR)长169 bp,于5'调控区克隆得到长为1 826 bp的序列,可能存在4个启动子序列。PmCOLVIA6蛋白含有典型的vWA结构域,但三股螺旋结构缺失。荧光定量分析表明PmCOLVIA6基因在马氏珠母贝的各个组织均有表达,而在珍珠囊和外套膜中央区的表达量显著高于其它组织。原位杂交结果显示PmCOLVIA6的mRNA主要分布于外套膜中央区的外表皮细胞。综上所述,PmCOLVIA6可能参与马氏珠母贝珍珠层的形成。
关键词
马氏珠母贝;COLVI;表达分析;原位杂交
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