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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 142 篇
收稿日期: 2015年12月28日 接受日期: 2016年02月02日
探讨肝细胞粘附分子(hepatocyte cell adhesion molecule, hepaCAM)对膀胱癌细胞BIU-87增殖活力的影响以及其调节机制。将BIU-87细胞分为对照组、空载组、hepaCAM组、LY294002组及hepaCAM与LY294002联用组,噻唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)检测细胞的增殖抑制率;Real-time PCR检测增值细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表达;Western blot法检测p-FOXO1的表达;同时用LY294002处理BIU-87细胞后Western Blot检测p-FOXO1、PCNA的表达。结果显示,单独运用hepaCAM过表达腺病毒或LY294002均能够明显抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖活力,hepaCAM过表达腺病毒与LY294002联用更加显著的增强了单独作用的抑制效果(p<0.05);Western Blot显示,hepaCAM基因的过表达使p-FOXO1的表达量显著降低(p=0.001);hepaCAM过表达腺病毒与LY294002联用后,与hepaCAM或LY294002分别作用相比,p-FOXO1 (p=0.014, p=0.047)和PCNA (p=0.002, p=0.004)的表达量降低明显;Real-time PCR结果显示,LY294002处理BIU-87细胞后,PCNA的表达明显减低(p=0.003),加入hepaCAM过表达腺病毒后更为显著地增强LY294002对PCNA的抑制作用(p=0.001)。本课题得出结论,hepaCAM基因过表达后通过下调p-FOXO1从而抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖活力,此作用与PCNA的表达量下调有关。