1广西医科大学基础医学院生理教研室, 南宁, 530021; 2广西医科大学护理学院, 南宁, 530021; 3广西中医药大学,南宁, 530200; 4广西中医药大学赛恩斯新医药学院, 南宁, 530222
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 141 篇
收稿日期: 2015年12月28日 接受日期: 2016年02月01日
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 141 篇
收稿日期: 2015年12月28日 接受日期: 2016年02月01日
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摘 要
C2C12细胞是常用于研究的肌细胞,广泛适用于肌肉再生、肌肉疾病、糖脂代谢以及药物研究实验。由于肌细胞结构较特殊,基因转染不容易成功。本文介绍脂质体介导的肌细胞瞬时转基因技术,国内外未见详细报道。我们实验室经优化细胞密度、质粒DNA纯度以及转染最佳时间等条件,并改变底物和稀释液的成份,将细胞分成几组:①底物Opti-MEM+稀释物DMEM组;②底物Opti-MEM+稀释物Opti-MEM组;③底物无血清DMEM+稀释物无血清DMEM组;④底物无血清DMEM+稀释物Opti-MEM组;⑤底物含10% FBS的DMEM+稀释物DMEM组进行转染。24 h后荧光倒置显微镜观察各组荧光表达情况,48 h westernblot检测GFP蛋白表达。结果C2C12细胞瞬时转染的细胞数量和荧光强度达到理想效果。其中第③组GFP蛋白表达水平明显高于第⑤组(p<0.05)。这是一种方便有效的脂质体介导C2C12细胞转基因技术。
关键词
C2C12;脂质体;转基因
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