黄玥萌 , 张笠 , 郭亚芬 , 蒋钦杨 , 兰干球

广西大学动物科学技术学院动物遗传育种实验室, 南宁, 530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 202 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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   本研究目的是克隆广西巴马小型猪ABCA1基因 CDs序列并构建真核表达载体。利用RT-PCR技术从广西巴马小型猪肝脏组织中扩增出ABCA1基因编码序列，直接插入至pEGFP-N1真核表达载体的Kpn I酶切位点，构建出重组质粒。之后将重组质粒pEGFP-N1-ABCA1转染PK15细胞，并于24h、48h后观察细胞荧光表达情况。收集转染48h后的PK15细胞，通过qRT-PCR检测ABCA1 mRNA相对表达量。结果表明：本实验成功构建了广西巴马小型猪ABCA1基因真核表达载体，重组质粒pEGFP-N1-ABCA1转染PK15细胞后，有绿色荧光蛋白表达，且与转染pEGFP-N1和空白组相比，pEGFP-N1-ABCA1转染组的ABCA1 mRNA表达量显著提高。本研究为下一步研究ABCA1基因的功能和调控及生产转ABCA1 基因广西巴马小型猪奠定基础。

广西巴马小型猪；ATP结合盒转运蛋白A1 (ABCA1)；PK15；pEGFP-N1载体；转基因猪