王婷 , 王晋蜀 , 张志慧 , 姜亚运 , 夏菁 , 苟理尧 , 刘梦瑶 , 张彦

重庆医科大学检验医学院, 重庆, 400016
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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 192 篇   
收稿日期: 2016年03月01日    接受日期: 2016年04月05日

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骨形态发生蛋白9 (bone morphogenetic proteins, BMP9)是骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)家族的一员，具有多种生物学功能。本实验主要是从体内、外两个层面模拟的脂肪微环境中，研究BMP9对乳腺癌细胞生长的影响。将前脂肪细胞3T3-L1诱导为成熟脂肪细胞后，利用Transwell小室共培养技术，将其分别与MDA-MB-231细胞、感染腺病毒AdGFP的对照MDA-MB-231/AdGFP细胞、感染腺病毒AdBMP9的MDA-MB-231/AdBMP9细胞进行共培养。针对共培养体系中的肿瘤细胞，采用EdU实验检测增殖能力的变化；流式细胞术检测细胞周期变化；western blot检测cyclin D1、c-myc蛋白水平的变化。将乳腺癌细胞与脂肪细胞以1:5的比例混合后，注射到裸鼠皮下，监测瘤体的生长并绘制生长曲线；取离体肿瘤组织进行免疫组化染色，检测瘤体中ki67、cyclin D1和c-myc的表达情况。结果显示，显微镜下可以观察到诱导后的3T3-L1细胞出现明显脂滴，能被油红O染色，证明成熟脂肪细胞诱导成功；RT-PCR及Western blot证实BMP9过表达成功；BMP9可以抑制共培养体系中肿瘤细胞的增殖(p＜0.05)，使其周期阻滞在G₂/M期(p<0.05)，并降低cyclin D1和c-myc的蛋白水平(p＜0.05)。动物移植瘤实验发现，BMP9高表达实验组的瘤体明显小于空白组和载体感染对照组；瘤体免疫组化结果显示，实验组ki67、cyclin D1和c-myc的表达均明显下调。本研究证明在体内、外模拟的脂肪微环境中，BMP9可以抑制乳腺癌细胞的增殖，且这种作用可能是通过下调cyclin D1和c-myc来实现的。

骨形态发生蛋白9；乳腺肿瘤；脂肪微环境；细胞生长