陆专灵¹ , 钟一治² , 赵忠添¹ , 卢智发¹ , 侯树鉴¹ , 李青¹ , 张益峰¹ , 韦友传²

1广西水产科学研究院, 南宁, 530021; 2广西大学, 南宁, 530005
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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 179 篇   
收稿日期: 2016年01月02日    接受日期: 2016年02月10日

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本研究在黄喉拟水龟中分离的肺炎克雷伯菌基础上，根据肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛的MrkD基因序列设计引物，通过对SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR反应条件、特异性、灵敏性实验进行调节优化，建立了肺炎克雷伯菌的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。研究结果表明，建立的肺炎克雷伯菌荧光定量PCR方法，检测时间短，用时73 min；特异性强，对非肺炎克雷伯菌无交叉反应；灵敏度高，检测肺炎克雷伯菌DNA的最低检测量为2.78 fg。该方法的建立，为肺炎克雷伯菌的辅助诊断、流行病学调查、毒力基因的分析提供科学借鉴。

肺炎克雷伯菌；SYBR-Green I荧光定量PCR