夏雪 , 石玉玲 , 喻艳琴 , 冯敏 , 王婷婷 , 方蓉 , 黄顺莉 , 曾柱 , 胡祖权

贵州医科大学生物与工程学院，贵阳，550004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 350 篇   
收稿日期: 2016年04月12日    接受日期: 2016年05月02日

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为了分析单链抗体的连接肽长度对其与小分子半抗原结合力的影响，本研究以含(G₄S)₃连接肽的伏马菌素特异单链抗体基因H2为模板，PCR 扩增获得含G₄S和(G₄S)₂连接肽的单链抗体编码基因，分别命名为H2-5和H2-10，通过基因工程操作构建到pHENHi载体中，转化大肠杆菌XL1-Blue进行原核表达，纯化后利用ELISA检测单链抗体的亲和力。结果显示含不同长度连接肽的单链抗体均能在大肠杆菌中可溶性表达，单链抗体结合力与连接肽长度的关系为(G₄S)₃>G₄S>(G₄S)₂，即单链抗体H2与其抗原伏马菌素的亲和力最高，其次为H2-5和H2-10抗体。因此，含有较长连接肽的单链抗体能够自身折叠形成有活性的蛋白，并表现出与小分子半抗原更强的结合能力。

单链抗体；连接肽；小分子半抗原；结合力