冯莹^1,2 , 丁安琪² , 潘东明²

1泉州师范学院资源与环境科学学院, 泉州, 362000; 2福建农林大学园艺学院, 福州, 350002
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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 523 篇   
收稿日期: 2016年07月19日    接受日期: 2016年08月23日

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以3年生水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)鳞茎主芽为材料，采用蒽酮-硫酸法测定可溶性糖含量；采用PCR法从主芽中分离克隆NtTIM基因并对其序列进行生物信息学分析；采用qRT-PCR方法分析主芽不同生长发育时期和温度诱导下的表达变化。可溶性糖含量测定结果表明，水仙鳞茎膨大期，主芽可溶性糖含量逐渐降低；休眠期先升高后降低；花芽分化期其含量在均衡的水平(4%左右)。生物信息学分析表明：分离克隆到了1个NtTIM基因，该基因含有765 bp开放阅读框，编码254个氨基酸，属于TIM-phosphate- binding基因家族，推导的氨基酸序列与油菜、芜菁、拟南芥、甘蓝等植物具有85%以上的同源性；编码的蛋白为稳定的呈酸性的疏水蛋白，无信号肽位点但含有1个跨膜结构域、2个N-糖基化位点。qRT-PCR分析表明，水仙生长发育过程中鳞茎膨大期主芽NtTIM基因表达量略升高；休眠期表达量呈阶段性降低；花芽分化期表达量略升高；20℃、25℃、30℃、35℃温度处理时，主芽NtTIM基因表达量随着温度升高而降低，且处理时间越长，其表达量越低。推测NtTIM基因参与调控水仙鳞茎主芽休眠。为进一步研究NtTIM基因的分子功能，以及深入研究水仙夏休眠的分子机制提供帮助。

水仙；可溶性糖；TIM基因；基因克隆；表达水平