吴敏 , 黄建芳 , 徐文文 , 程晓芳 , 郭晓萍 , 杨秀荣 , 郭亚芬 , 兰干球

广西大学动物科学技术学院, 南宁, 530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 309 篇   
收稿日期: 2016年03月08日    接受日期: 2016年04月11日

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本试验旨在构建广西巴马小型猪miR-181b 慢病毒表达载体，以广西巴马小型猪基因组DNA为模板，利用PCR扩增miR-181b前体序列，构建重组质粒pLV-miR-181b，经PCR和测序鉴定，阳性重组质粒转染C2C12细胞，荧光倒置显微镜下检测转染效率。结果显示，miR-181b前体序列长度为377 bp，与预期片段序列长度一致。将鉴定为阳性的miR-181b重组质粒转染C2C12细胞48 h后，在荧光显微镜下检测到较强的绿色荧光蛋白的表达，说明重组miR-181b质粒在C2C12细胞中具有较高的表达活性。本研究成功构建了具有高表达活性的miR-181b重组慢病毒表达载体，为研究miRNA-181b调控骨骼肌生长发育的功能机制提供实验基础。

广西巴马小型猪； 慢病毒载体； 骨骼肌；mir-181b基因