王怀琴 , 郭晓荣 , 杨新兵 , 苏娇 , 曹晓燕

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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 399 篇   
收稿日期: 2016年05月11日    接受日期: 2016年06月11日

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根据NCBI数据库公布的R2R3-MYB类转录因子SmPAP1基因序列(GenBank 登录号GU218694.2)，构建丹参SmPAP1的酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7-SmPAP1，检测pGBKT7-SmPAP1的自激活活性及其对酵母AH109细胞的毒性。以SmPAP1为诱饵筛选构建到pGADK7中的丹参cDNA文库，挑取阳性克隆进行测序，并在NCBI数据库中进行BLAST比对分析。利用Uniprot在线网站，对筛选到的60个基因进行了功能注释。对其中4个候选互作蛋白，包括病程相关类蛋白AP2/ERF，氧化还原酶类蛋白SmC4H，逆境胁迫相关类蛋白SmWRKY及bHLH转录因子类蛋白SmMYC2进行回转验证实验。通过酵母双杂交实验，确定SmPAP1与AP2/ERF类、SmC4H、SmWRKY及SmMYC2相互作用。这些数据为深入探究SmPAP1调控丹参中酚酸类化合物合成的分子机理提供了参考。

丹参；SmPAP1；酵母双杂交；互作蛋白