许黎明 , 成春燕 , 吕军

广西科学院生物研究所, 南宁, 530007
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 212 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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聚乳酸由可再生原料L-乳酸合成，是目前应用的最环保的生物塑料之一。鼠李糖乳杆菌JCM1553中的L-乳酸和D-乳酸，它们是由代谢途径中的L-乳酸脱氢酶和D-乳酸脱氢酶分别催化丙酮酸而生成。L-乳酸的光学纯度对于L-乳酸的应用至关重要。因此，为了获取光学纯的L-乳酸，需要敲除该鼠李糖乳杆菌编码D-乳酸脱氢酶的基因ldhD以阻断相关的D-乳酸代谢途径。本研究采用pK18mobsacB自杀质粒，运用重叠延伸PCR和同源重组技术成功构建得到重组鼠李糖乳杆菌菌株JCM1553-ΔldhD。构建的缺失突变体JCM1553-ΔldhD菌株没有引入外源基因，完全符合食品、药品安全要求，发酵液中检测到的L-乳酸含量为99.92%，光学纯度达到99.84%，显著优于野生型菌株。

鼠李糖乳杆菌；L-乳酸；ldhD基因；同源重组；基因敲除