薛生玲 , 张芬 , 夏雪 , 冷祯敏 , 陈清 , 汤浩茹 , 孙勃

四川农业大学园艺学院, 成都, 611130
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 264 篇   
收稿日期: 2016年02月24日    接受日期: 2016年03月16日

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本研究以‘明丰香菇’芥蓝叶片总RNA为模板，采用同源克隆法设计并合成特异性引物，采用反转录PCR技术克隆得到芥蓝类胡萝卜素生物合成关键结构基因——八氢番茄红素脱氢酶基因BaPDS1。序列分析表明，该基因cDNA序列长1692 bp，编码563个氨基酸，推测蛋白等电点为5.96，理论分子量为63.1507 kDa；序列比对发现芥蓝BaPDS1基因编码的氨基酸序列与甘蓝、花椰菜、油菜等植物的PDS具有很高的同源性；系统进化树分析表明，芥蓝PDS1与甘蓝PDS1蛋白的亲缘关系最为接近。之后构建pEASY-Blunt E1-BaPDS1原核表达载体，转入Transetta(DE3)感受态细胞中，诱导后获得特异表达蛋白条带，且大部分以包涵体形式存在。研究结果为揭示芥蓝BaPDS1基因功能奠定了基础。

芥蓝；八氢番茄红素脱氢酶；基因克隆；原核表达