牛义岭 , 姜秀明 , 许向阳

作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 279 篇   
收稿日期: 2016年02月02日    接受日期: 2016年03月02日

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以醋栗番茄（LA2184）为材料，运用生物信息学方法和PCR技术，预测SIGLD1基因与番茄抗冷的相关性，设计SIGLD1基因的特异性引物，克隆出片段长度为413bp的序列，以番茄八氢番茄红素脱氢酶（phytoenedesaturase，PDS) 基因作为阳性对照，克隆片段长度为427bp，系统进化树显示，SIGLD1基因与拟南芥中已发表过的抗冷基因聚类在一起，利用RT–PCR技术，检测SIGLD1基因在不同冷处理时间点上的表达量，发现SIGLD1基因在3–6h的表达量最高，说明该基因在番茄的抗冷过程中发挥重要作用，以烟草脆裂病毒（TRV2）为载体成功构建出SIGLD1、PDS基因的病毒诱导基因沉默的重组载体。构建的 pTR V2 －SIGLD1、pTRV2 － PDS 重组载体将为下一步利用 VIGS 技术在番茄上研究 SIGLD1基因的功能验证奠定实验基础。

番茄；SIGLD1；基因克隆；载体构建