陈慧^1,2 , 王会芳² , 陈绵才²

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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 406 篇   
收稿日期: 2016年05月11日    接受日期: 2016年06月11日

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    Hsp70基因的表达量在研究中常作为一个重要的生理指标来反映机体的状况。当机体遭遇高温、缺氧、低温等恶劣环境时，Hsp70基因通常会上调表达，以维持细胞中关键蛋白质的空间构象，维持细胞生命活动，使机体损伤程度降低。为研究MeHsp70基因相关功能，本研究前期成功构建pEASY-E1-MeHsp70和pET30a-MeHsp70两个原核表达载体，通过热激转化将两个原核表达载体分别转入大肠杆菌Escherichia coli BL21进行表达。转入MeHsp70基因的大场杆菌BL21、转入空载的大肠杆菌BL21和大肠杆菌BL21原始菌种在55℃、65℃进行热稳定性测定，在37℃、200r/min条件下进行生长曲线测定。在热稳定性试验中发现，转入pET30a-MeHsp70基因的大场杆菌生存时间较长，而转入pEASY-E1-MeHsp70的菌株、转入空载的菌株以及原始菌株热稳定性都相对较差。通过荧光定量PCR测定发现MeHsp70基因均有上调表达，转入pET30a-MeHsp70基因的大场杆菌Hsp70基因水平高于其他菌株。生长曲线测定试验中发现，重组菌株与原始菌株生长曲线基本一致，转入pET30a-MeHsp70载体的菌株调整期滞留时间长于其他菌株。

象耳豆根结线虫,；热休克蛋白70基因；大肠杆菌；抗逆性；生长曲线