周英¹ , 谢红卫² , 刘长爱¹ , 况琼¹ , 潘境涛¹ , 陈秋生¹ , 徐伟标¹ , 余潮¹ , 彭晓珏¹

1 南昌大学生命科学学院, 江西省分子生物学与基因工程重点实验室, 南昌, 330031; 2 江西省超级水稻研究发展中心, 南昌, 330200
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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 520 篇   
收稿日期: 2016年07月19日    接受日期: 2016年08月22日

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植物凝集素是含有一个或者多个非催化结构，并能可逆结合特异单糖或寡糖的蛋白，它具有凝集细胞、沉淀多糖和糖蛋白的功能。近年来，植物凝集素因其独特的生理功能，在农作物抗虫工程中获得了广泛的关注。本研究采用RT-PCR的方法，从浙江苞萝黄大豆叶片中成功克隆了一个新的豆科凝集素Le4基因，利用pET-28a质粒构建了Le4基因的原核表达载体，成功表达了Le4蛋白。通过对诱导温度及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度等条件进行优化，利用Western blotting技术，在Le4表达菌株超声破碎后的上清液中检测到了可溶性的Le4蛋白。通过涂抹法将含有可溶性Le4表达蛋白的大肠杆菌菌液涂抹在小麦叶片上，与涂抹空载体菌液相比，小麦叶片麦长管蚜数目减少了约50%。以上结果初步表明来源于大豆的凝集素基因Le4蛋白具有杀虫效应。

植物凝集素；Le4； 大豆；原核表达；抗虫