肖越 , 邵淑丽 , 李鹏辉 , 张伟伟 , 孙婴宁 , 孙鑫迪

齐齐哈尔大学生命科学与农林学院, 齐齐哈尔, 161006
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 480 篇   
收稿日期: 2016年07月20日    接受日期: 2016年08月23日

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本研究以A549/DDP细胞为实验对象，利用shRNA (short hairpin RNA)沉默MDR1基因，逆转人肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。构建3种靶向MDR1基因重组干扰载体，稳定转染A549/DDP细胞，qRT-PCR检测MDR1 mRNA表达水平，Western blotting检测MDR1蛋白表达水平，MTT法检测细胞对顺铂的敏感性。结果显示成功构建了3种靶向MDR1的重组表达载体p2.1-1、p2.1-2和p2.1-3。3种干扰表达载体均能有效沉默A549/DDP细胞MDR1基因表达，其中p2.1-3对MDR1沉默效果最好，对mRNA和蛋白的沉默效率分别为51.47%和53.24%。转染p2.1-3的细胞对顺铂的IC50由(72.08±7.00) μmol/L降至(31.89±3.39) μmol/L，逆转率达到(67.60±5.70)%。这些结果表明靶向MDR1的重组干扰载体均能够有效抑制MDR1表达，其中p2.1-3干扰效果最佳并且能逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。

A549/DDP细胞；MDR1；RNAi；多药耐药