司景磊 , 李龙 , 郭晓萍 , 陈秋明 , 夏利 , 申玉建 , 蒋钦杨 , 兰干球 , 梁晶 , 郭亚芬

广西大学动物科学技术学院, 南宁, 530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 363 篇   
收稿日期: 2016年04月05日    接受日期: 2016年05月09日

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本实验的目的在于构建PLV-miR-122慢病毒载体并在293T细胞和猪胚胎细胞中进行验证。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板，克隆miR-122前体及部分侧翼序列，利用T4连接酶将其连入pLV-CMV-MCS-EF1载体，构建PLV-miR122慢病毒载体。在293T细胞中过表达PLV-miR-122，通过胞质注射生产转PLV-miR-122的猪胚胎。双酶切和测序结果证明成功构建了PLV-miR122重组载体，将重组载体转染293T细胞，经胞质注射后观察到其在猪胚胎早期和囊胚期均有绿色荧光表达。本实验成功构建了猪miR-122慢病毒表达载体，在293T细胞中过表达同时生产出转miR-122的阳性胚胎，为后续研究miR-122的功能奠定基础。

广西巴马小型猪；miR-122基因；慢病毒表达载体；胞质注射