李妍 , 邵淑丽 , 李旭艳 , 张伟伟 , 孙婴宁 , 肖越

齐齐哈尔大学生命科学与农林学院, 齐齐哈尔, 161006
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 464 篇   
收稿日期: 2016年06月28日    接受日期: 2016年07月26日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

本研究利用短发夹shRNA(short hairpin RNA)沉默SGC7901/ADM细胞MDR1基因，从而逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性。根据MDR1基因序列设计并合成编码shRNA的DNA模板，构建三种靶向MDR1基因重组干扰载体，稳定转染SGC7901/ADM细胞，qRT-PCR检测MDR1 mRNA表达水平，Western Blot检测MDR1蛋白表达水平，MTT法检测细胞对紫杉醇的敏感性。结果表明，成功构建了靶向MDR1基因的三种重组表达载体，分别转染SGC7901/ADM细胞后均能不同程度沉默MDR1基因的表达，其中p2.1-3对MDR1沉默效果最好，mRNA和蛋白的沉默效率分别为78.5%和45%。紫杉醇对细胞的IC₅₀值由(3.147±0.494) μmol/L降至(0.714±0.059) μmol/L，逆转率达到78.22±1.906%。结果表明，靶向MDR1的干扰表达载体能够抑制MDR1基因的表达，从而逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性。

SGC7901/ADM细胞；MDR1；RNAi；紫杉醇