王芬 , 陈地龙 , 陈益 , 李海星 , 熊伟 , 石雪萍 , 吕晓婷 , 李静

重庆医科大学干细胞与组织工程研究室, 重庆医科大学, 重庆, 400016
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2017 年, 第 36卷, 第 42 篇   
收稿日期: 2016年08月09日    接受日期: 2016年09月15日

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本实验探究乳腺癌MCF-7细胞中干扰PGI的表达对HIF-1α的调控以及对细胞凋亡的影响。首先，使用慢病毒质粒转染构建干扰PGI (PGI-siRNA)的稳转细胞株，然后使用Hoechst33258染色和流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡，随后，采用RT-PCR检测PGI、HIF-1α和LDHA基因的表达，Western blotting检测Bcl-2、Bax、PGI、LDHA、HIF-1α和ERK蛋白的表达。成功构建PGI-siRNA的MCF-7稳转细胞株后，Hoechst33258染色实验结果显示，PGI-siRNA稳转细胞株中出现核固缩、染色质凝集等形态学改变，FCM结果亦表明PGI-siRNA稳转细胞株发生细胞凋亡。RT-PCR结果显示，PGI-siRNA稳转细胞株中PGI、LDHA和HIF-1α基因表达下调，Western blotting结果显示，PGI-siRNA稳转细胞株中LDHA、HIF-1α、ERK和Bcl-2蛋白表达下调，Bax蛋白表达上调。以上实验结果表明：在乳腺癌MCF-7细胞中，干扰PGI可抑制HIF-1α的表达，同时促进MCF-7细胞凋亡。

PGI；HIF-1α；MCF-7细胞；细胞凋亡