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基因组学与应用生物学, 2017 年, 第 36卷, 第 19 篇
收稿日期: 2016年08月09日 接受日期: 2016年09月14日
本研究首先通过分子生物学方法克隆了鲢鱼血红素加氧酶1 (heme oxygenase 1, HO-1)和白细胞介素10受体1 (interleukin-10 receptor 1, IL-10R1)两个基因的cDNA片段,然后在腹腔注射微囊藻毒素-LR (microcystin-LR, MC-LR) 0.25 h、0.5 h和1 h后的三个时间点进行鲢鱼肝脏样本的采集,并利用荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)分析肝脏组织中HO-1和IL-10R1基因表达量的变化。实验结果:(1) 克隆得到的鲢鱼HO-1和IL-10R1基因cDNA片段大小分别为133 bp和182 bp,Blast分析发现鲢鱼HO-1基因cDNA片段与鲤鱼、鲫鱼、斑马鱼的基因序列都有很高的同源性,比例分别为93%、92%、86%;克隆得到的鲢鱼IL-10R1基因cDNA片段与草鱼、鲫鱼和斑马鱼的基因序列的同源性比例分别为98%、91%、81%。(2) qPCR结果显示HO-1基因在注射MC-LR 0.25 h后表达量显著升高,在0.5 h时开始略有下降,在1 h时表达量继续升高。IL-10R1基因表达量在三个时间点均显著升高,并处于持续上升趋势。总结,在MC-LR的刺激下,HO-1基因被诱导大量合成起到保护细胞的作用,而IL-10R1基因表达量的升高可能会引起IL-10基因发挥功能作用参与炎症及免疫反应,表明HO-1和IL-10R1基因在鲢鱼去MC-LR的过程中都发挥着重要作用,更为进一步研究鲢鱼MC-LR的解毒机制提供了理论依据。