曹衡玉¹ , 欧阳征仁¹ , 尹海辉¹ , 张霞¹ , 王剑² , 曾慰³

1南华大学附属第二医院超声医学科, 衡阳, 421001; 2南华大学附属第一医院急诊科, 衡阳, 421001; 3南华大学附属第二医院胸心外科, 衡阳, 421001
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基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 462 篇   
收稿日期: 2016年06月27日    接受日期: 2016年07月27日

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本研究为观察穿心莲内酯(AD)对乙醇诱导肝细胞氧化应激损伤的保护作用，体外培养肝细胞L-02，用不同浓度(0~30μmol/L) AD孵育1 h，随后加入100 mmol/L乙醇作用24 h。ELISA测定AD处理前后细胞培养上清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量；比色法检测丙二醛(MDA)和谷胱氨肽(GSH)的变化；荧光探针DCFH₂-DA检测胞内活性氧(ROS)的产生；Western blot和分析血红素氧合酶-1(HO-1) mRNA和蛋白的表达。电泳迁移率实验(EMSA)检测核转录因子Nrf2的DNA结合活性。结果表明，100 mmol/L乙醇处理肝细胞后，可在不影响L-02活性的情况下显著增加培养上清中ALT和AST的含量，而AD预处理后可抑制ALT、AST、MDA和ROS的增加以及上调胞内GSH的水平。此外，Western blot和实时定量PCR结果也证实乙醇可降低肝细胞内源性HO-1的表达，而AD预处理后可增强转录因子Nrf2的活性并进一步上调HO-1的表达水平。AD可能通过激活Nrf2上调HO-1表达而发挥对乙醇所致肝细胞损伤的保护作用。

穿心莲内酯；乙醇；肝细胞