贵州医科大学生物与医学工程重点实验室, 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心, 贵州医科大学生物与工程学院, 贵阳, 550004
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 475 篇
收稿日期: 2016年06月27日 接受日期: 2016年07月26日
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 475 篇
收稿日期: 2016年06月27日 接受日期: 2016年07月26日
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摘 要
根据NCBI数据库中的黄曲霉细胞壁蛋白AFLMP1基因序列设计特异性引物,以黄曲霉菌总RNA逆转录获得的cDNA为模板,PCR 扩增目的基因后分别克隆到pGEX-6p-1和pET-22b原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后超声波破碎提取可溶性蛋白,SDS-PAGE电泳和Western杂交检测表达产物,结果表明GST-AFLMP1和AFLMP1-His融合蛋白能够在大肠杆菌中大量可溶性表达,可分别作为制备AFLMP1特异抗体的免疫抗原和筛选抗原。
关键词
黄曲霉;细胞壁蛋白;基因克隆;可溶性表达
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