罗思思 , 谢芝勋 , 刘加波 , 谢丽基 , 庞耀珊 , 邓显文 , 谢志勤 , 范晴 , 彭宜

广西兽医研究所, 广西畜禽疫苗新技术重点实验室, 南宁, 530001
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2012 年, 第 31卷, 第 2 篇   
收稿日期: 2012年01月02日    接受日期: 2012年02月28日

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33K蛋白是I群禽腺病毒(FAVI)的非结构蛋白，在感染的过程中起重要作用。为了构建原核表达载体pGEX-33K作为诊断抗原，本研究根据GenBank中FAVI 33K基因序列，设计1对特异性引物。用PCR方法扩增目的片段，将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，构建了重组质粒pGEX-33K。将其转化大肠杆菌感受态细胞DH5α，经IPTG诱导和SDS-PAGE分析，pGEX-33K表达的分子量为36.7 kD，表达产物主要以可溶性的形式存在于菌体中；最佳IPTG诱导浓度为0.75 mmol/L，最佳诱导时间为4 h；经Western-blot鉴定，pGEX-33K重组蛋白可与FAVI阳性血清发生特异性反应，为FAVI抗体ELISA鉴别诊断试剂盒的研究奠定基础。

I群禽腺病毒；33K蛋白；原核表达