于兴达¹ , 王佩佩¹ , 汪亚媛¹ , 贾秀琪¹ , 张国松¹ , 尹绍武¹ , 陈树桥² , 周国勤¹

1南京师范大学, 生命科学学院, 江苏省生物多样性与生物技术重点实验室, 南京, 210023
2南京市水产科学研究所, 南京, 210036
作者    通讯作者
水生生物研究, 2016 年, 第 5卷, 第 9 篇   
收稿日期: 2016年08月31日    接受日期: 2016年09月27日    发表日期: 2016年10月16日

本文首次发表在 《基因组学与应用生物学》(2016年第35卷第2期285-293页)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License,协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。

推荐引用：

引用格式(中文)：

于兴达等, 2016,  河川沙塘鳢TLR2基因的克隆及表达分析, 基因组学与应用生物学, 35 (2): 285-293 (10.13417/j.gab.035.000285)

引用格式(英文)：

Yu et al., 2016, Clone and expression analysis of TLR2 gene from Odontobutis potamophila, Genomics and Applied Biology, 35 (2): 285-293 (10.13417/j.gab.035.000285)

本研究以河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)为研究对象，采用RACE、实时荧光定量PCR等技术，首次对该鱼的TLR2基因进行了克隆和表达模式分析。主要研究结果如下：TLR2基因的cDNA全长序列3 473 bp，包括2 631 bp开放阅读框(ORF)、75 bp的5’UTR区和767 bp的3’UTR区，并且具有脊椎动物典型的加尾信号AATAAA和26 bp的polyA尾巴，推测该序列编码876个氨基酸。蛋白结构预测表明TLR2蛋白的TIR结构域和LRR基序符合TLR家族的共同特征，其蛋白分子也存在多个功能位点。系统树中河川沙塘鳢与所有鱼类聚类为独立的分支，与鲈形目亲缘关系最近。应用RT-PCR法检测健康河川沙塘鳢鱼体中TLR2基因的mRNA组织表达差异情况。结果显示，TLR2基因在检测的12种组织中均有表达，在肝、肾、肠、血液和胃中都有较高的表达水平。人工感染嗜水气单胞菌后，对河川沙塘鳢3种主要免疫组织(脾、肾、肝)中进行不同时段表达量变化的检测，结果表明，TLR2基因在脾中感染后4 h表达水平发生下降，随后的24~48 h又上升，48 h时达到顶峰，72~96 h维持在略低于24 h水平上。在肾中，感染后表达水平持续上升，且24~96 h间保持相对稳定的表达水平。在肝组织中，感染后一直呈现上升趋势，72 h时达到顶峰，其他时段表达水平相差不大。可见TLR2在河川沙塘鳢抵御外源微生物侵染的先天免疫中发挥重要作用。

河川沙塘鳢；TLR2；RT-PCR；表达分析