2新乡学院生物技术研究中心, 新乡, 453003
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计算分子生物学, 2013 年, 第 2卷, 第 6 篇
收稿日期: 2013年06月21日 接受日期: 2013年06月21日 发表日期: 2013年06月21日
引用格式(中文):
刘卫, 朱艳平, 宁红梅, 银梅, 郭东光, 鲁毅, 王选年, 2013, 猪瘟病毒 NS2-3 抗原集中区基因的原核表达及鉴定, 基因组学与应用生物学, 32(2): 165-169
引用格式(英文):
Liu W., Zhu Y.P., Ning H.M., Yin M., Guo D.G., Lu Y., and Wang X.N., 2013, Prokaryotic Expression and Identification of the Main Antigenic Domain Gene in NS2-3 of Classical Swine Fever Virus, Jiyinzuxue Yu Yingyong Shengwuxue (Genomics and Applied Biology), 32(2): 165-169
为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV) NS2-3 抗原集中区蛋白,并建立 CSFV 抗体快速 检测方法。本研究以 CSFV 全长基因组质粒为模板,PCR 扩增 NS2-3 抗原表位集中区,利用扩增片段和克隆载体,构建重组表达质粒,命名为 pET32a-NS2-3-1。重组表达质粒转化 Rosetta (DE3)细胞,利用 IPTG 诱导表达,SDS-PAGE 电泳和 Western-blot 鉴定重组表达产物。结果表明,重组质粒 pET32a-NS2-3-1 在 28℃诱导 5 h 得到高效表达,重组蛋白能够与兔抗 CSFV 阳性血清发生反应。获得 CSFV NS2-3 抗原集中区蛋白,并且获得的重组蛋白具有抗原性,能够作为 CSFV 抗体检测的抗原。