萝卜蛋白组分析中叶片蛋白质高效提取方法  

相菲 , 徐良 , 王燕 , 龚义勤 , 赖德强 , 柳李旺
南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室, 农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室, 南京农业大学园艺学院, 南京, 210095
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2012 年, 第 10卷, 第 77 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0077
收稿日期: 2012年06月14日    接受日期: 2012年07月17日    发表日期: 2012年12月23日
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本文首次发表在 《分子植物育种》 (2012年第10卷第6期756-760页)上。现依据版权所有人授权的许可协议,采用 Creative Commons Attribution License,协议对其进行授权,再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。
推荐引用:

引用格式(中文):
相菲等, 2012, 萝卜蛋白组分析中叶片蛋白质高效提取方法, 分子植物育种(online) Vol.10 No.77 pp.1559-1564 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0077)
引用格式(英文):
Xiang et al., 2012, Effective Method of Leaf Protein Extraction for Proteomic Analysis in Radish, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol.10 No.77 pp.1559-1564 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0077)

摘 要

以萝卜‘NAU-JLQX09’叶片为材料,分别采用Tris-HCl/TCA-丙酮沉淀法和改进的PEG分级沉淀法提取蛋白质,通过双向凝胶电泳技术比较两种方法的效果。结果表明,应用Tris-HCl/TCA-丙酮沉淀法提取的蛋白2-DE图谱可识别出640个蛋白点;而改进的PEG分级沉降法的蛋白组分(F1, F2以及F3) 2-DE图谱可清晰识别蛋白点数目分别为537,170与852,总蛋白点数目多且高丰度蛋白RuBisCO主要被沉降在F2中,F3中分离到更多的低丰度蛋白点。因此,在进行萝卜叶片蛋白质组分析时,采用PEG分级沉降法提取叶片蛋白,可获得较高质量的2-DE凝胶图谱。研究结果为应用蛋白质组学解析萝卜重要性状形成分子基础提供了良好的技术支持。

关键词
萝卜;蛋白质提取; 蛋白质组学; 双向电泳
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《分子植物育种》网络版
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