徐岭贤 , 赵福宽 , 孙清鹏 , 郝芮

北京农学院生物技术学院, 北京, 102206
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2012 年, 第 10卷, 第 69 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0069
收稿日期: 2012年07月01日    接受日期: 2012年08月17日    发表日期: 2012年12月19日

本文首次发表在 《分子植物育种》(2012年第10卷第6期701-706页)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License,协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。

推荐引用：

引用格式(中文)：
徐岭贤等, 2012, 美洲南瓜WRKY4基因克隆与序列分析, 分子植物育种(online) Vol.10 No.69 pp.1505-1510 (doi: 10.5376/mpb. cn.2012.10.0069)
引用格式(英文)：
Xu et al., 2012, Cloning and Sequence Analysis of WRKY4 Gene in Zucchini (Cucurbita pepo), Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol.10 No.69 pp.1505-1510 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0069)
 

美洲南瓜(Cucurbita pepo)幼叶为材料，采用Trizol方法进行总RNA的提取。根据GenBank上已提交的黄瓜WRKY4基因序列保守区域设计特异性引物，扩增得到1条长度为497 bp的WRKY4转录因子基因片段，利用已知中间序列，通过RT-PCR和RACE (rapid amplification cDNA ends)等技术，克隆得到美洲南瓜WRKY4的cDNA全长序列，长度为1 722 bp，5'非翻译区为185 bp，3'非翻译区为118 bp，开放阅读框为1 419 bp，编码472个氨基酸，分子量约为51.40 kD，等电点约为8.36，GenBank登录号为JX096811。用Blast和DNAMAN软件对其核苷酸序列进行分析，结果显示，美洲南瓜WRKY4与黄瓜WRKY4同源性达到87%。美洲南瓜WRKY4基因克隆及序列分析为以后研究此基因的功能奠定了基础。

美洲南瓜；WRKY4；田间验证；田间验证；田间验证